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01 背景
心肌梗死、心肌病、血流動(dòng)力學(xué)負(fù)荷過(guò)重、炎癥等任何原因引起的心肌損傷,均可造成心肌結(jié)構(gòu)和功能的變化,導(dǎo)致心室泵血和(或)充盈功能低下,最終誘發(fā)心力衰竭。
心力衰竭的主要臨床表現(xiàn)為呼吸困難、乏力,以及肺瘀血和外周水腫。心力衰竭的發(fā)病機(jī)制和干預(yù)治療的研究還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足臨床要求,這就需要建立成熟穩(wěn)定的心力衰竭動(dòng)物模型來(lái)了解疾病進(jìn)程以及研究新的治療方法。
02 實(shí)驗(yàn)材料和方法
實(shí)驗(yàn)材料:1. SD大鼠(雄性,180-220g)2.異氟烷 3.動(dòng)物呼吸機(jī) 4.通用型小動(dòng)物麻醉機(jī)
造模方法:1、適應(yīng)性喂養(yǎng)7天,運(yùn)用異氟烷和脂肪乳混合做成乳化異氟烷的方式,腹腔注射麻醉大鼠。2、頸部剪開(kāi),鈍性分離出氣管,經(jīng)口插管,連接呼吸機(jī),用先調(diào)整好的參數(shù)(大鼠呼吸頻率80,吸呼比1:1,潮氣量6.4) 鈍性分離胸腔左側(cè)肌肉,暴露肋間,從第3肋和第4肋間撕開(kāi)肌肉,暴露心臟,輕輕撕開(kāi)一點(diǎn)心包膜,用6-0帶線(xiàn)縫合針于左心耳與動(dòng)脈圓錐之間進(jìn)針,心電圖ST抬高表示結(jié)扎成功,之后縫合好肋間肌肉和胸腔肌肉,過(guò)5-10分鐘撤掉呼吸機(jī),待老鼠恢復(fù)自主呼吸,放置于籠內(nèi)。3造模完成之后4-8周取材心臟組織。
評(píng)價(jià)指標(biāo):血清指標(biāo)ELISA檢測(cè),Masson染色
03 模型驗(yàn)證
◆ Masson染色
Masson染色結(jié)果:正常組大鼠心肌組織基本呈紅色,無(wú)明顯藍(lán)色膠原纖維化組織。模型組心肌纖維化較嚴(yán)重,大量膠原纖維增生,可見(jiàn)大片藍(lán)色心肌膠原沉積于心肌細(xì)胞及血管周?chē)?/span>
◆ HE染色
HE染色結(jié)果:正常組大鼠心肌纖維排列整齊有序,心肌細(xì)胞形態(tài)正常、輪廓清晰。模型組心肌細(xì)胞肥大、胞質(zhì)腫脹,邊界模糊不清,排列紊亂,細(xì)胞間隙明顯增寬,有炎性細(xì)胞浸潤(rùn),間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)毛細(xì)血管擴(kuò)張?jiān)錾G倚募〖?xì)胞損傷嚴(yán)重,呈小灶狀或片狀壞死。
◆ 血清指標(biāo)ELISA檢測(cè)
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